手术切除的结直肠癌组织中的肿瘤干细胞的培养及鉴定

作     者：唐娜 周略 成志强 邓永键 丁彦青 TANG Na;ZHOU Lue;CHENG Zhiqiang;DENG Yongjian;DING Yanqing

作者机构：南方科技大学第一附属医院//深圳市人民医院病理科广东深圳518020 暨南大学第二临床医学院//深圳市人民医院病理科广东深圳518020 南方科技大学第一附属医院//深圳市人民医院放疗科广东深圳518020 南方医科大学南方医院病理科广东广州510515 南方医科大学基础医学院病理学系广东广州510515 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2019年第39卷第4期

页      面：415-421页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家重点研发计划(973项目 2016YFC1201801) 国家自然科学基金(81702359 81672453) 广东省自然科学基金(2015A030310089)资助 深圳市科技计划项目(JCYJ20180301170035531)~~ 

主　　题：肿瘤干细胞 结直肠癌 原代培养 

摘      要：目的获得结直肠癌患者手术切除癌组织的肿瘤干细胞(CSC),培养并鉴定其干细胞特性。方法通过原代培养手术切除结直肠癌组织获得结直肠癌细胞,再通过有限稀释法和无血清培养法筛选结直肠癌CSC,软琼脂集落实验检测CSC和对照组人结直肠癌细胞株SW480的增殖能力;用低数量级细胞裸鼠皮下成瘤实验,检测结直肠癌CSC和SW480的成瘤能力;并运用Western blot及免疫荧光方法,检测CSC和SW480的免疫表型。结果临床结直肠癌标本原代培养的CSC,加入血清培养可使CSC分化。软琼脂集落形成实验结果显示,原代培养的CSC克隆形成率为56.64%和54.45%,对照组人结直肠癌细胞株SW480的克隆形成率为4.41%,CSC与SW480集落形成率的差异具有统计学意义(P0.01)。裸鼠皮下成瘤实验中,原代培养的CSC皮下注射500个细胞可形成皮下瘤,而SW480皮下注射500个细胞不形成皮下瘤。CSC表达CD133、CD44,不表达CK7;SW480细胞不表达CD133、CD44,表达CK7。结论原代培养的手术切除结直肠癌组织标本获得的肿瘤细胞,再行无血清培养可形成CSC,鉴定具有CSC的自我更新及分化能力。