过表达YAP对过氧化氢诱导皮肤成纤维细胞氧化损伤的影响

作     者：王露 张政 高丽 陈华全 周发忠 WANG Lu;ZHANG Zheng;GAO li;CHEN Huaquan;ZHOU Fazhong

作者机构：四川省妇幼保健院皮肤科四川成都610031 成都市第三人民医院四川成都610031 德阳市人民医院皮肤科四川德阳618000 

出 版 物：《中国皮肤性病学杂志》 (The Chinese Journal of Dermatovenereology)

年 卷 期：2019年第33卷第5期

页      面：501-506页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 100206[医学-皮肤病与性病学] 

基　　金：德阳市人民医院课题基金资助(2017SZ081) 

主　　题：皮肤成纤维细胞 凋亡 氧化损伤 YAP 

摘      要：目的研究过表达Yes相关蛋白(YAP)对过氧化氢(H_2O_2)诱导皮肤成纤维细胞氧化损伤的影响。方法皮肤成纤维细胞中转染pcDNA3.1-YAP质粒、对照pcDNA3.1质粒,经过H_2O_2处理后记为pcDNA3.1-YAP+H_2O_2、pcDNA3.1+H_2O_2,同时设置不转染的皮肤成纤维细胞经H_2O_2处理后记为H_2O_2,以不做任何处理的皮肤成纤维细胞作为对照。Real-time PCR和Western blot方法检测细胞中YAP表达变化,MTT检测细胞增殖,2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平,钼酸铵比色法检测过氧化氢酶(CAT)活性,硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,二硫对二硝基苯甲酸比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,羟脯氨酸法检测胶原合成水平。结果 pcDNA3.1-YAP+H_2O_2细胞中YAP水平高于pcDNA3.1+H_2O_2和对照(P0.05)。H_2O_2细胞增殖能力降低,LDH漏出率升高,细胞凋亡率升高,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平升高,CAT活性、SOD活性、GSH-PX活性降低,细胞中MDA含量升高,胶原含量降低,与对照比较,差异有统计学意义(P0.05)。pcDNA3.1-YAP+H_2O_2细胞增殖能力升高,LDH漏出率降低,细胞凋亡率降低,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平降低,CAT活性、SOD活性、GSH-PX活性升高,细胞中MDA含量降低,胶原含量升高,与pcDNA3.1+H_2O_2和H_2O_2比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论过表达YAP可以减轻H_2O_2诱导的皮肤成纤维细胞氧化损伤,减少细胞凋亡。