萝卜硫素对HER2 CAR-T细胞分化、细胞内因子分泌及抗肿瘤作用的影响

作     者：申春一 张震 田永贵 张毅 SHEN Chunyi;ZHANG Zhen;TIAN Yonggui;ZHANG Yi

作者机构：郑州大学第一附属医院生物细胞治疗中心郑州450052 郑州大学第一附属医院肿瘤中心郑州450052 河南省肿瘤免疫与生物治疗重点实验室郑州450052 

出 版 物：《郑州大学学报（医学版）》 (Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences))

年 卷 期：2019年第54卷第3期

页      面：340-344页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81771781 U1804281 81802857) 国家重点研发计划重点专项资助项目(2018YFC1313400) 河南省重大科技专项资助项目(161100311000) 

主　　题：萝卜硫素 嵌合抗原受体修饰T细胞 CD8^+T细胞 糖酵解 分化 

摘      要：目的:探讨萝卜硫素(SFN)对靶向人类表皮生长因子受体-2(HER2)的嵌合抗原受体修饰T细胞(CART)分化、细胞内因子分泌、抗肿瘤能力的影响。方法:采用密度梯度离心法及细胞免疫磁珠分选健康供者外周血CD8^+ T细胞,制备HER2 CAR-T细胞,用15μmol/L SFN处理72 h后检测其分化情况。将HER2 CAR-T细胞与A549共孵育,检测HER2 CAR-T细胞内IFN-γ和TNF-α的表达及A549细胞的凋亡,采用qRT-PCR检测细胞糖酵解途径相关酶[己糖激酶2(HK2)、磷酸果糖激酶(PFKM,PFKP)、丙酮酸激酶(PKM)]及脂肪酸氧化过程相关酶[肉毒碱棕榈酰基转移酶(CPT1A)]mRNA的表达。以未经SFN处理的细胞作为对照。结果:与对照组相比,SFN组中心记忆性T细胞亚群比例增加(P 0. 05),IFN-γ及TNF-α分泌水平增加,对A549细胞的杀伤能力增强(P 0. 05),HK2、PFKM、PFKP和PKM mRNA表达下调,CPT1A mRNA表达上调(P 0. 05)。结论:SFN通过抑制糖酵解途径促进HER2 CAR-T细胞向记忆亚群分化,同时增强其抗肿瘤效应。