SIRT3过表达通过调控细胞代谢转换抑制肾肿瘤细胞的增殖

作     者：刘欢 陈宇凌 徐仁华 许嘉桐 邓海腾 LIU Hum;CHEN Yu-ling;XU Ren-hu;XU Jia-tong;DENG Hai-teng

作者机构：清华大学生命科学学院教育部生物信息学重点实验室北京100084 滨州医学院护理学院山东烟台264003 

出 版 物：《现代生物医学进展》 (Progress in Modern Biomedicine)

年 卷 期：2019年第19卷第5期

页      面：801-806页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家重点研究与发展计划项目(2017YFA0505103 H.T.D) 山东省医药卫生科技发展计划项目(2016WS0013 R.H.X) 

主　　题：SIRT3 肾透明细胞癌 定量蛋白质组学 代谢组学 

摘      要：目的:研究SIRT3对肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma, ccRCC)769-P细胞增殖和抗氧化能力的影响,并进一步探究其作用机制。方法:在769-P细胞的基础上构建SIRT3过表达稳转细胞系;利用CCK-8试剂检测769-P SIRT3过表达细胞的增殖速度;利用CellROX~Deep Red染料并结合流式细胞分析检测SIRT3过表达对769-P细胞中ROS水平的影响;利用定量蛋白质组学和代谢组学的方法,探究SIRT3对769-P细胞的作用机制。结果:CCK-8实验结果表明,769-P SIRT3过表达细胞的生长速度与对照细胞相比下降了约48%;定量蛋白质组学分析显示,769-P SIRT3过表达细胞中ALDOA、ALDOA、ENO2、PKM、LDHA、LDHB表达量下调约0.4至0.7倍,SDHB和CS上调约1.3倍;代谢组学分析显示,PEP、pyruvic acid、lactate、carnitine水平下降约0.4至0.7倍,isocitric acid和acetyl-CoA水平升高分别约1.3和2.8倍;分析还显示SIRT3过表达上调SOD2、TXN、GPX4和GLRX5的表达量约1.3至2倍,降低ROS水平约40%,增强细胞对过氧化氢的耐受力。结论:SIRT3过表达引起769-P细胞的代谢转换,从而抑制其增殖;且上调769-P细胞中抗氧化酶的表达,降低ROS水平,增强细胞的抗氧化能力。