外周血白细胞中人巨细胞病毒pp65抗原的定位及意义

作     者：章莉 张玥 方风琴 钱春艳 季育华 ZHANG Li;ZHANG Yue;FANG Fengqin;QIAN Chunyan;JI Yuhua

作者机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025 

出 版 物：《检验医学》 (Laboratory Medicine)

年 卷 期：2008年第23卷第2期

页      面：131-134页

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金：上海市教育委员会科研项目(04BA04) 

主　　题：人巨细胞病毒 磷酸基质蛋白65抗原血症 共聚焦显微镜 定位 白细胞 外周血 

摘      要：目的明确人巨细胞病毒(HCMV)磷酸基质蛋白65(pp65)抗原在阳性细胞中的定位并初探其定位与病毒活动间的关系,为指导临床病毒抗原血症的监测提供依据。方法利用4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染料能与细胞双链DNA结合的特点,在激光共聚焦显微镜下对HCMV pp65单抗阳染细胞进行抗原定位;同时通过外周血白细胞与病毒共培养技术,检测分析其定位与病毒活动的关系。结果临床标本检测的HCM- Vpp65抗原阳染细胞的表现形式有3种,即细胞浆型、细胞核型和细胞浆核混合型,其中细胞核中的HCMV pp65抗原聚集于细胞核的内部,而非仅仅附着于核表面。进一步的白细胞与病毒共培养结果显示,只有野生型病毒株感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)与外周血白细胞共培养,才能检出HCMV pp65抗原阳性的白细胞,而且表现为仅初期(培养1 h内)可检出细胞浆阳染型,随着时间延长,约80%～90%的抗原阳染白细胞表现为细胞核型,偶见细胞浆核混合型。结论HCMV pp65抗原血症时阳染的外周血白细胞的表现形式有3种,即细胞核型、细胞浆型以及细胞浆核混合型,其中细胞核型属细胞核内部型,并非细胞核表面附着型。结合共培养结果认为,细胞核型阳染细胞的检出更能提示病毒的活动。