线性与分枝状聚乙烯亚胺介导基因体外转染的比较与研究

作     者：余冰菲 张垲 陈瑞川 刘润忠 YU Bing-fei;ZHANG Kai;CHEN Rui-Chuan;LIU Run-Zhong

作者机构：厦门大学生命科学学院福建厦门361005 

出 版 物：《厦门大学学报（自然科学版）》 (Journal of Xiamen University：Natural Science)

年 卷 期：2008年第47卷第A02期

页      面：36-39,44页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：国家基础科学人才培养基金项目(J0630649) 国家自然科学基金(30670408 30572077) 福建省自然科学基金(2008J0108)资助 

主　　题：聚乙烯亚胺 线性 分枝状 转染效率 肝素释放 

摘      要：聚乙烯亚胺(PEI)是一类新兴的阳离子多聚物非病毒载体,可缩聚DNA分子形成颗粒并转入真核细胞进行表达.本文选用分子量750 ku分枝状PEI与分子量25 ku线性PEI转染增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因于HeLa细胞,并对这两种PEI的转染效率进行比较.利用MTT法检测比较线性PEI与分枝状PEI的细胞毒性.通过凝胶阻滞实验比较两种PEI结合DNA能力.最后利用肝素介导释放实验比较两者在形成PEI/DNA复合物后释放DNA的能力.研究结果表明:线性PEI转染效率优于分枝状PEI,且随PEI/DNA质量比的增加而升高,而分枝状PEI则相反;两种PEI细胞毒性在一定范围内相近;分枝状PEI结合DNA能力略强于线性PEI;但是分枝状PEI释放DNA的能力远小于线性PEI.这可能导致DNA在细胞内无法从PEI/DNA复合体上释放出来,从而影响转录的正常进行,最终导致分枝状PEI转染效率下降.