SDF-1/CXCR4轴在骨髓基质细胞共培养介导K562细胞伊马替尼耐药的作用研究

作     者：王吉刚 周凡 刘彦琴 白颖 刘景华 李敏燕 Wang Jigang;Zhou Fan;Liu Yanqin;Bai Ying;Liu Jinghua;Li Minyan

作者机构：沈阳军区总医院血液科沈阳110016 

出 版 物：《中国医师杂志》 (Journal of Chinese Physician)

年 卷 期：2014年第16卷第10期

页      面：1353-1357页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：辽宁省科学技术计划重大、重点项目(2009225009-11) 

主　　题：白血病,髓系,慢性,BCR-ABL阳性/药物疗法 共同培养技术 趋化因子CXCL12 受体,CXCR4 骨髓细胞 K562细胞 药物耐受性 哌嗪类/治疗应用 嘧啶类/治疗应用 

摘      要：目的 构建慢性髓细胞白血病骨髓基质细胞-K562细胞共培养模型,观察慢性髓细胞白血病骨髓基质细胞共培养对K562细胞伊马替尼敏感性的影响,并探讨基质细胞衍生因子1（SDF-1）/趋化因子受体4（CXCR4）轴在伊马替尼耐药形成中的作用.方法 从慢性髓细胞白血病患者骨髓分离、培养骨髓基质细胞,与K562细胞共培养构建慢性髓细胞白血病骨髓基质细胞-K562细胞共培养模型.将K562细胞暴露于0.5μmol/L伊马替尼72 h,流式细胞术检测K562细胞凋亡率及CX-CR4表达.将0.5μmol/L伊马替尼作用4h并以Calckin-AM荧光标记的K562细胞接种于基质细胞层培养24 h,去除悬浮细胞,收集黏附的K562细胞通过检测荧光强度计算细胞黏附率.以10 μg/ml的CXCR4单克隆抗体12G5阻抑SDF-1/CXCR4轴,四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT）检测伊马替尼IC50.结果 0.5μmol/L伊马替尼处理72 h,悬浮组及骨髓基质细胞共培养组K562细胞凋亡率分别为（15.48 ±4.17）％及（32.01 ±6.83）％,两组比较差异有统计学意义（t=5.587,P=0.001）.悬浮组伊马替尼作用前后K562细胞CXCR4表达阳性率分别为（11.28±3.44）％及（25.34±3.21）％,其差异有统计学意义（t=5.863,P=0.001）;共培养组伊马替尼作用前后K562细胞CXCR4表达阳性率分别为（20.31±3.76）％及（53.64±5.35）％,其差异有统计学意义（t=5.959,P=0.001）.0.5μmol/L伊马替尼作用4h使K562细胞与骨髓基质细胞的黏附率由（42.18±6.17）％提升至（68.97±11.08）％（t=2.468,P=0.027）.以10 μg/ml的CXCR4抗体12G5阻抑SDF-1/CXCR4轴后共培养组IC5o为（0.68±0.04）μmol/L,与未加抗体对照组（1.27±0.05） μmol/L比较,差异有统计学意义（t=4.869,P=0.001）.结论 慢性髓细胞白血病骨髓基质细胞共培养能介导K562细胞对伊马替尼耐药,其机制可能与基质细胞共培养及伊马替尼诱导K562细胞CXCR4的表达有关,阻抑SDF-1/CXCR4信号轴可在一定程度上逆转骨髓微环境介导的伊马替尼耐药.