犬小孢菌PQ-LRP蛋白的定位研究

作     者：刘洋 徐宇 张芙蓉 谭灿 杨国玲 Liu Yang;Xu Yu;Zhang Furong;Tan Can;Yang Guoling

作者机构：大连医科大学附属第一医院皮肤科116011 

出 版 物：《中华皮肤科杂志》 (Chinese Journal of Dermatology)

年 卷 期：2019年第52卷第3期

页      面：189-192页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81071330). 

主　　题：小孢子菌属 定位标记 绿色荧光蛋白质类 犬小孢子菌 PQ-LRP 蛋白定位 

摘      要：目的用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记犬小孢子菌PQ-LRP蛋白,明确PQ-LRP蛋白在犬小孢子菌中的定位。方法提取犬小孢子菌总RNA,反转录为cDNA作为模板,PCR扩增PQLRP基因,将PQ-LRP基因与EGFP基因构成融合基因,连接到pCAMBIA 1300质粒载体.采用根癌农杆菌转化法对犬小孢子菌进行转化,使融合基因LRP-EGFP在真菌通用启动子(Ptrpc)和终止子(Ttrpc)调控下在犬小孢子菌中整合型表达,激光共聚焦显微镜检测融合蛋白的细胞定位。结果成功构建表达载体pCAMBIA-LRP-EGFP,融合基因LRP-EGFP在犬小孢子菌中获得整合型表达。激光共聚焦显微镜下LRP-EGFP的荧光信号呈颗粒状或团块状集中于犬小孢子菌的细胞膜上。结论LRP-EGFP融合基因在犬小孢子菌中成功表达,且PQ-LRP蛋白定位于犬小孢子菌细胞膜上。