邻苯二甲酸二乙酯诱导的大鼠尿道下裂与Mafb的表达相关:基于转录组测序结果

作     者：向涵 王绍 周玥 刘星 沈炼桔 龙春兰 张德迎 何大维 林涛 魏光辉 HAN Xiang;SHAO Wang;YUE Zhou;XING Liu;SHEN Lianju;LONG Chunlan;ZHANG Deying;HE Dawei;LIN Tao;WEI Guanghui

作者机构：儿童泌尿生殖发育与组织工程重庆市重点实验室 重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科重庆400014 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2019年第39卷第4期

页      面：456-463页

核心收录：

学科分类：100405[医学-卫生毒理学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然基金(81370782) 重庆医科大学附属儿童医院临床研究项目(lcyj2015-5) 

主　　题：尿道下裂 邻苯二甲酸二乙酯 转录组测序 Mafb 

摘      要：目的通过转录组测序筛选大鼠尿道发育过程中相关差异基因,并进行验证;探究邻苯二甲酸二乙酯(DEHP)诱导SD大鼠尿道下裂的发生机制。方法 40只成年SD孕鼠随机分成4组(n=10),前两组予以空白对照处理,分别于妊娠期16 d(GD16组)和GD19 d(GD19组)剖宫产取出雄性胎鼠,将收集好的胎鼠阴茎组织进行转录组测序,lllumina HiSeq 2000筛选出差异表达基因(DEGs),然后对DEGs进行差异基因功能(GO)和pathway显著富集性分析;选取其中的DEG(Mafb)进行免疫荧光验证。后两组分别予以玉米油(对照组)和DEHP [750 mg/(kg·d)](DEHP暴露组)于GD12 d至GD19 d每日灌胃处理,GD19 d剖宫产取出雄性胎鼠,并判断有无尿道下裂的发生。扫描电镜和HE染色观察阴茎组织形态学改变,免疫荧光和Western blot检验阴茎组织中Mafb、β-catenin的表达水平。结果 GD19组胎鼠阴茎组织与GD16组胎鼠阴茎组织转录组测序结果示1360个DEGs(其中上调797个,下调563个),差异基因主要富集于细胞粘着斑信号通路、轴突导向信号通路、细胞外基质受体作用信号通路等,选取DEG(Mafb)进行免疫荧光验证,发现Mafb的表达随发育显著增加,与测序结果相符。而DEHP暴露组胎鼠阴茎组织与对照组胎鼠阴茎组织相比,Mafb、β-catenin表达水平显著下调(P0.01)。结论随着大鼠阴茎组织的正常发育,Mafb的表达逐渐增加;而DEHP暴露组较对照组Mafb、β-catenin表达显著下调,提示β-catenin信号通路影响Mafb表达可能与DEHP诱导大鼠尿道下裂发生相关。