HCV NS3/4A基因外来表达对Huh7细胞凋亡及DNA损伤应答的影响

作     者：任来峰 唐子执 吴惠文 许宁 刘刚 曾鸣 郭莲娣 Ren Laifeng;Tang Zizhi;Wu Huiwen;Xu Ning;Liu Gang;Zeng Ming;Guo Liandi

作者机构：山西医科大学汾阳学院医学检验系汾阳032200 山西省汾阳医院肿瘤科汾阳032200 四川大学华西第二医院发育与干细胞研究所成都610041 

出 版 物：《中国细胞生物学学报》 (Chinese Journal of Cell Biology)

年 卷 期：2014年第36卷第8期

页      面：1110-1115页

核心收录：

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：山西省自然科学基金(批准号:2014021037-9) 山西医科大学汾阳学院博士启动基金(批准号:1301)资助的课题~~ 

主　　题：DNA损伤 丙型肝炎病毒 DNA双链断裂 非结构蛋白3 4A 

摘      要：NS3/4A是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)编码的丝氨酸蛋白酶复合体,是病毒完成自身复制周期的必要成分。该研究为调查NS3/4A对细胞凋亡及DNA损伤应答(DNA-damage response,DDR)的影响,在Huh7细胞中表达了外来NS3/4A基因。通过DAPI染色和MTT分析显示,外来表达NS3/4A显著诱导细胞的凋亡和增殖活力的下降。免疫荧光检测结果表明,NS3/4A可明显增加细胞内源性DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)损伤(γH2AX灶点升高);而进一步用X-ray诱导细胞外源性DSBs损伤后,外来表达NS3/4A的细胞显示出明显的DSBs损伤修复缺陷(减缓的γH2AX灶点消退)。免疫印迹法检测结果显示,NS3/4A可抑制喜树碱(Camptothecin,CPT)诱导的ATM第1 981位丝氨酸的磷酸化(pATM1 981)。以上结果提示,NS3/4A基因外来表达可引起细胞DNA损伤,抑制ATM介导的DSBs损伤修复信号,诱导细胞凋亡通路的活化。