超声及超声微泡联合shRNA质粒对survivin基因的沉默效应

作     者：陈智毅 梁琨 柳建华 CHEN Zhi-Yi;LIANG Kun;LIU Jian-Hua

作者机构：广州医学院第三附属医院医学超声科广州510150 广州医学院第三附属医院妇产科广州510150 广州市第一人民医院功能科广州510180 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2009年第25卷第9期

页      面：797-800,807页

核心收录：

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 100207[医学-影像医学与核医学] 1002[医学-临床医学] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

主　　题：超声 微泡 基因 survivin RNA干扰 非病毒载体 

摘      要：目的:研究超声及超声微泡联合短发夹状RNA(shRNA)干扰技术对宫颈癌细胞(Hela)survivin基因的沉默效应。方法:构建3个靶向survivin基因的shRNA真核表达质粒(pSIREN/S1/S2/S3)和无关序列质粒(pSIREN/con),对培养的Hela细胞行超声及超声微泡联合处理(US+SO)或脂质体转染,以空白细胞组、单纯超声辐照组、pSIREN/S1组、超声辐照+pSIREN/S1组为对照,应用蛋白质印迹和RT-PCR检测survivin蛋白表达及mRNA转录水平的变化。结果:酶切、测序分析证实重组质粒构建成功。RT-PCR和蛋白质印迹法表明,3种pSIREN/S均可抑制Hela细胞内survivin mRNA和蛋白质的表达(P0.05),而pSIREN/con无此作用,以pSIREN/S3的抑制效果最显著(P0.05);US+SO组的mRNA和蛋白表达水平的抑制率分别为(87.04±1.80)%和(85.94±1.02)%,均显著高于其他各组(P0.05)。结论:survivin可将作为宫颈癌基因治疗的理想靶标,超声及超声微泡联合shRNA干扰技术可显著沉默靶基因survivin的表达。