HBD-2转基因小鼠的建立及鉴定

作     者：张舒 黄宁 赵新宇 王青松 杨洋 成勇 鞠辉明 熊文碧 储国君 李绚 王伯瑶 Zhang Shu;Huang Ning;Zhao Xinyu;Wang Qinsong;Yang Yang;Cheng Yong;Ju Huiming;Xiong Wenbi;Chu Guojun;Li Xuan;Wang Boyao

作者机构：四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室成都610041 扬州大学兽医学院扬州225009 

出 版 物：《生物医学工程学杂志》 (Journal of Biomedical Engineering)

年 卷 期：2006年第23卷第2期

页      面：396-399页

核心收录：

学科分类：10[医学] 

基　　金：CMB(98-681)资助项目 国家自然科学基金资助项目(30470763) 

主　　题：β-防御素 人β防御素2 转基因小鼠 

摘      要：人β防御素2(Hum an beta defens in 2,HBD-2)是人体抗菌肽的重要分子,体外试验研究证明具有广谱抗微生物活性,为开展其在整体水平上的功能研究,建立HBD-2转基因小鼠模型。用分子克隆方法构建了带CM V启动子的HBD-2全长cDNA真核重组表达质粒pCDNA 3.1-HBD 2,以此为摸板,PCR扩增出带CM V启动子和BGHpo lyA尾的HBD-2基因片段,用显微注射技术将此微基因导入小鼠雄原核中,于M 16培养液培养后经输卵管移植到受体鼠体内让其怀孕产生子代小鼠。PCR法检测外源基因在小鼠基因组中的整合,RT-PCR和免疫组化法检测HBD-2在小鼠组织的表达。PCR检测结果显示17只F0代转基因鼠中4只检测到阳性信号,RT-PCR和免疫组化检测显示HBD-2在其F1代转基因小鼠生殖道、呼吸道、泌尿道以及血管内皮等组织部位广泛表达。实验表明HBD-2基因已整合到小鼠基因组且广泛表达,为进一步研究HBD-2的生物学功能及基因调控提供了有用的整体动物模型。