贝类派琴虫PCR检测方法的建立及初步应用

作     者：谢丽基 谢芝勋 庞耀珊 刘加波 邓显文 谢志勤 XIE Li-ji;XIE Zhi-xun;PANG Yao-shan;LIU Jia-bo;DENG Xian-wen;XIE Zhi-qin

作者机构：广西兽医研究所南宁530001 

出 版 物：《渔业科学进展》 (Progress in Fishery Sciences)

年 卷 期：2011年第32卷第1期

页      面：82-85页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家百千万人才工程人选专项资金项目(945200603) 广西科技攻关项目(桂科攻0630001-3M)共同资助 

主　　题：派琴虫 PCR 应用 

摘      要：根据派琴虫的基因保守序列设计了特异性引物,对派琴虫的DNA进行PCR扩增并将产物克隆到pMD18-T载体后测序。结果表明,扩增大小为596bp,与预期扩增序列同源性为99.8%。该PCR方法检测灵敏度高,最低可检测1pg的派琴虫DNA;特异性强,对荧光假单胞菌、嗜水气单胞菌、大肠杆菌、葡萄球菌、副溶血弧菌、沙门氏菌、诺瓦克样病毒等贝类病原体的扩增均为阴性。用该PCR技术对广西沿海的104份牡蛎、49份贻贝和20份文蛤病料进行检测,阳性率分别为14.6%、10.6%和15.0%。结果显示,派琴虫广泛存在于中国南方沿海的养殖贝类中,建立的PCR方法可用于贝类派琴虫的临床快速检测。