集胞藻PCC6803铜离子诱导表达平台的构建

作     者：高宏 唐蜻 徐旭东 GAO Hong;TANG Qing;XU Xu-Dong

作者机构：中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室 

出 版 物：《水生生物学报》 (Acta Hydrobiologica Sinica)

年 卷 期：2007年第31卷第2期

页      面：240-244页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071008[理学-发育生物学] 

基　　金：国家自然科学基金重点项目(30330030) 中国科学院知识创新工程方向性项目(KSCX-2-SW-332)资助 

主　　题：集胞藻 PpetE lacZ 铜离子 

摘      要：在集胞藻PCC6803中,基因敲除是研究基因功能的最直接有效的方法,但是对于某些生存必需的基因则无法通过这种方法获得突变株。为研究集胞藻PCC6803中此类基因的功能,在其基因组中构建了一个petE基因启动子(PpetE)控制的铜离子诱导表达的平台。将集胞藻PpetE装配在lacZ报告基因的上游,通过同源双交换整合到这种蓝藻的基因组中。通过调节培养基中铜离子的浓度发现,lacZ的表达能够人为控制。特别是当铜离子浓度在6—400nmol/L范围时,LacZ活力随铜离子浓度增加呈S型增长关系。利用这个铜离子诱导表达平台,可以控制某些必需基因的表达:提供铜离子维持细胞生存;而撤去铜离子时则关闭基因的表达,可以观察其对生命活动的影响。