大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭蛋白-yijP的表达纯化

作     者：王淳 方文刚 陈誉华 WANG Chun;FANG Wen-gang;CHEN Yu-hua

作者机构：中国医科大学基础医学院发育生物学研究室 

出 版 物：《中国医科大学学报》 (Journal of China Medical University)

年 卷 期：2005年第34卷第1期

页      面：16-18页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：大肠杆菌 人脑微血管内皮细胞 血脑屏障 yijP基因 

摘      要：目的:研究大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因yijP的编码产物在大肠杆菌侵袭脑微血管内皮细胞中的作用,以期阐明大肠杆菌穿过血脑屏障的机制。方法:应用PCR方法获取yijP基因C末端 1. 04kb片断(编码333个氨基酸),将其克隆到PQE载体并转化到受体菌M15,以构建出表达N 末端带有 6个组氨酸的yijP融合蛋白的工程菌。通过Ni NTAAgarose亲和层析法提纯yijP融合蛋白,初步分析该蛋白对人脑微血管内皮细胞 (HB -MEC)生长的影响。结果:成功获得了分子量为 41kd的yijP融合蛋白,并发现yijP蛋白对HBMEC有较强的细胞毒作用。结论:大肠杆菌脑微血管内皮细胞侵袭基因yijP的编码产物 yijP蛋白可能是一种细胞毒因子。