犬骨髓间质干细胞体外培养和鉴定

作     者：曾晶晶 周诺 黄旋平 廖凤春 陈亚莉 ZENG Jing-jing;ZHOU Nuo;HUANG Xuan-ping;LIAO Feng-chun;CHEN Ya-li

作者机构：广西医科大学附属口腔医院南宁市530021 

出 版 物：《实用医学杂志》 (The Journal of Practical Medicine)

年 卷 期：2013年第29卷第16期

页      面：2649-2651页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:81160132) 广西壮族自治区自然科学基金资助项目(编号:桂科自0991013Z) 

主　　题：骨髓 间充质干细胞 犬 细胞培养 诱导分化 

摘      要：目的:建立犬骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的体外分离、培养和鉴定方法,以期为应用BMSCs作为种子细胞提供实验基础。方法:采集犬胫骨骨髓组织,采用全骨髓贴壁培养法体外分离、培养和扩增犬骨髓间充质干细胞。倒置相差显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物,成骨和成软骨诱导培养鉴定,观察细胞生物学特性。结果:原代和传代的BMSCs贴壁生长,呈纺锤形、长梭形,漩涡状排列、成集落生长。细胞表面标志物CD 90、CD 29、CD44分子阳性,CD34和HLA-DR分子阴性。经成骨诱导后钙结节形成并茜素红染色阳性,诱导期间碱性磷酸酶活性持续增高。成软骨诱导后HE染色见软骨组织,甲苯胺蓝染色见细胞基质异染成紫红色。结论:成功建立了犬BMSCs体外分离纯化、培养的有效方法,扩增的BMSCs具有多向分化潜能,是理想的组织工程种子细胞。