SCN5A基因启动区+495bp～+584bp片段的克隆与功能分析

作     者：张振明 李晖 董钦 刘宇 李凤兰 马宁 李金波 刘端阳 舒畅 逄淑超 

作者机构：哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 

出 版 物：《哈尔滨医科大学学报》 (Journal of Harbin Medical University)

年 卷 期：2007年第41卷第6期

页      面：527-530页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：黑龙江省自然科学基金资助项目(D2005-29) 黑龙江省教育厅海外学人重点项目资助(1054QH014) 哈尔滨医科大学医学基础学科青年科学基金(060022) 黑龙江省卫生厅科技项目基金(2006-272) 

主　　题：SCN5A基因 转录调控 顺式作用元件 荧光素酶报告基因 

摘      要：目的为了研究大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp区域内的顺式作用元件对转录调控的影响。方法应用聚合酶链反应扩增大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-promoter重组,以pGL3-promoter空载体为对照,瞬时转染人胚肾母细胞(HEK293)和小鼠胚胎心肌细胞(H9C2),检测荧光素酶活性。结果成功构建的pGL3-P1重组载体的荧光素酶活性与pGL3-promoter对照载体相比,在HEK293细胞无明显差别(P0.05),在H9C2细胞荧光活性增高(22.5±5.4)倍(P0.01)。结论大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp区域存在对基因的转录调控活性具有增强作用的组织特异性顺式作用元件。