rd11小鼠视锥细胞变性过程中视蛋白的变化特点

作     者：韩娟娟 戴旭锋 戚艳 张华 庞继景 Han Juanjuan;Dai Xufeng;Qi Yan;Zhang Hua;Pang Jijing

作者机构：温州医科大学附属眼视光学院325027 

出 版 物：《中华实验眼科杂志》 (Chinese Journal Of Experimental Ophthalmology)

年 卷 期：2014年第32卷第1期

页      面：12-17页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81371060) 

主　　题：rd11小鼠 自发性视网膜变性 视锥细胞 视蛋白 视网膜铺片 免疫荧光染色 

摘      要：背景视网膜变性11（rd11）小鼠是近年来新发现的一种自发突变的视网膜变性小鼠。研究证实，rd11小鼠出生后随着鼠龄的增长出现快速的光感受器变性，且视杆细胞变性早于视锥细胞变性，但对于视网膜不同区域视锥细胞变性的特点还不十分清楚。目的应用视网膜铺片免疫荧光染色技术观察不同鼠龄rd11小鼠M-视蛋白和S-视蛋白在视网膜的表达分布及变化特点，为相关疾病的基因治疗研究提供实验依据。方法取出生后14、28、42d的rd11小鼠各5只，制备视网膜铺片，采用免疫荧光组织化学法分别标记小鼠视网膜后极部颞上、颞下、鼻上和鼻下象限M-视蛋白和S-视蛋白的表达，观察随rd11小鼠鼠龄的变化视网膜各区域M-视蛋白和S-视蛋白的荧光形态和密度，并与相应鼠龄的C57BL／6J小鼠进行比较。结果出生14d的rd11小鼠视网膜M-视蛋白和S-视蛋白的红色荧光形态和密度与C57BL／6J小鼠接近，但出生28d的rd11小鼠视网膜后极部颞上、颞下、鼻上、鼻下4个区域M-视蛋白和S-视蛋白表达密度均明显降低，荧光形态由纺锤形逐渐变为点状，出生42d的rd11小鼠视网膜部分区域M-视蛋白和S-视蛋白表达消失。出生28d的rd11小鼠视网膜后极部颞上、颞下、鼻上、鼻下区域M-视蛋白的表达密度分别为（414±32）、（300±8）、（324±22）和（250±20）个／0．037mm^2，明显低于同龄C57BL／6J小鼠的（484±21）、（442±19）、（459±34）和（436±12）个／0．037mm^2，差异均有统计学意义（t=4．114、15．225、7．505、17．990，均P〈0．05）；上述4个区域S-视蛋白的表达密度下降更明显，分别为（8±4）、（175±16）、（74±13）、（315±20）个／0．037mm^2，明显低于C57BL／6J小鼠的（73±16）、（436±30）、（393±30）和（480±19）个／0．037mm^2，差异均有统计学意义（t=8．555、17．076、21．637、13．498，均P〈0．05）。结论rd11小鼠视锥细胞中的M-视蛋白和S-视蛋白均随着鼠龄的增长而急剧减少，以S-视蛋白更为明显。随着鼠龄的增长，rd11小鼠M-视蛋白变性从视神经周围区向鼻下方，再向颞上方逐渐进展，而S-视蛋白变性由颞上方向鼻下方逐渐进展。