我国登革2型病毒43株基因组全长cDNA体外RNA转录物感染性的研究

作     者：欧武 秦鄂德 于曼 杨翠红 杨佩英 

作者机构：军事医学科学院微生物学流行病学研究所北京100850 

出 版 物：《军事医学科学院院刊》 (Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences)

年 卷 期：2000年第24卷第4期

页      面：251-254页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助课题 

主　　题：登革热病毒 全长cDNA 体外转录 感染性 

摘      要：目的 :研究我国登革 2型病毒 4 3株 (D2 4 3)基因组全长cDNA体外RNA转录物的感染性 ,为进一步阐明登革 2型病毒的致病机制及探索其新型疫苗奠定基础。方法 :用SP6RNA聚合酶系统制备D2 4 3基因组全长cDNA的体外RNA转录物 ,纯化后经电穿孔法转染C6/ 36细胞 ,观察致细胞病变作用以判断其感染性。从病变的细胞和培养上清中提取总RNA ,通过RT PCR扩增及克隆测序的方法证实细胞病变确为RNA转录物感染所致 ;同时收集可产生细胞病变的培养上清 ,再感染C6/ 36细胞以进一步证实该体外RNA转录物感染的稳定性。结果 :以我国D2 4 3病毒株基因组全长cDNA为模板制备的体外RNA转录物可使C6/ 36细胞产生病变 ,从病变细胞和培养上清中可扩增获得病毒特异的基因片段。在培养细胞中进行连续传代仍可产生细胞病变作用。结论 :构建的我国D2 4 3株基因组全长cDNA的体外RNA转录物对传代蚊细胞具有感染性 ,表明可产生完整的病毒颗粒。本研究可为阐明登革 2型病毒的致病机制及探索新的预防和治疗措施奠定基础。