乏氧条件启动HRE调控HSV-TK/GCV效应链对人肺腺癌A549细胞杀伤作用的观察
Hypoxic condition switching on the killing effect of HRE regulated HSV-TK/GCV system on human lung adenocarcinoma A549 cells作者机构:第三军医大学新桥医院实验技术中心重庆400037 第三军医大学新桥医院肾内科重庆400037
出 版 物:《中华肿瘤防治杂志》 (Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment)
年 卷 期:2008年第15卷第4期
页 面:248-251页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
主 题:肺肿瘤 腺癌 缺氧 反应条件 单纯疱疹病毒属 胸苷激酶 更昔洛韦
摘 要:目的:观察由缺氧反应元件(HRE)调控的单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)系统对乏氧环境中的人肺腺癌细胞系A549细胞的杀伤作用。方法:将HRE调控HSV-TK和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双基因共表达的真核载体pHRE-TK通过脂质体导入A549细胞,分别在乏氧(O2浓度为3%)和常氧(O2浓度为21%)环境中培养,荧光显微镜观察重组载体转染A549细胞后报告基因EGFP表达变化,并进行荧光光密度(FOD)分析;再予以GCV处理5d后,用MTT法检测GCV对培养细胞的杀伤效果。设立分别仅含有HRE、HSV-TK以及两者均无的3个荧光表达载体(pHRE、pTK、pEGFP)为对照组。结果:在乏氧环境中,由HRE调控的重组载体pHRE-TK和pHRE转染A549细胞后,其FOD值高于无HRE调控的载体pTK和pEGFP转染组P0.05。携带HSV-TK基因的重组载体pHRE-TK和pTK转染A549细胞后,细胞对GCV的敏感性均高于无HSV-TK基因的pHRE组细胞,P0.05。结论:在乏氧的A549细胞内,HRE使报告基因EG-FP表达增强;HRE能增强HSV-TK/GCV系统对乏氧环境中的A549细胞的杀伤效率。