日本血吸虫新基因SjPP的筛选、克隆及对小鼠的免疫效果
Screening,Cloning and Immunological Efficiency of SjPP,a Novel Schistosoma japonicum Gene作者机构:中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室/上海动物生物技术研究中心 中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室/上海动物生物技术研究中心 上海200232
出 版 物:《中国农业科学》 (Scientia Agricultura Sinica)
年 卷 期:2006年第39卷第8期
页 面:1659-1666页
核心收录:
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:上海市科学技术发展基金项目(014909002,054909002) 上海市重大科技攻关项目(03DZ19231) 国家“863”计划项目资助(2004AA2Z3510)
主 题:日本血吸虫 东方田鼠 丝/苏氨酸蛋白磷酸酶 核酸疫苗 免疫保护
摘 要:目的筛选克隆东方田鼠血清识别的日本血吸虫靶抗原基因,并研究其免疫保护效果。方法利用东方田鼠感染血清免疫筛选日本血吸虫(中国大陆株)成虫cDNA表达文库获得阳性克隆,以5′RACE技术扩增获基因全长序列,构建含目的基因的核酸疫苗并研究在小鼠中的免疫保护效果。结果(1)获得4个日本血吸虫新的EST序列,即mfs-1(GenBank登录号BE974942)、mfs-3(GenBank登录号BE974944)、mfs-4(GenBank登录号BE974945)和mfs-5(GenBank登录号BE974946)。(2)mfs-5进行全长序列克隆,获得的日本血吸虫新基因SjPP(GenBank登录号AY902477)长1311bp,编码302个氨基酸,理论分子量为34.7kD,等电点为5.51;其氨基酸序列具有丝/苏氨酸蛋白磷酸酶(serine/threoninespecificproteinphosphatase,简称PP)的保守序列LRGNHE,并且含有该酶特异性抑制剂冈田酸的作用位点SAPNYC,与人的PP6、鼠PP6、果蝇PPⅤ等蛋白的氨基酸序列具有高度同源性,分别达72%、70%和70%。(3)成功构建核酸疫苗pCMV-Script/SjPP,免疫BALB/c小鼠诱导产生肝组织减卵率为23.91%,粪便减卵率为31.91%。结论(1)获得日本血吸虫新的抗原基因SjPP。(2)含SjPP基因的核酸疫苗在小鼠中诱导了部分免疫保护效果。