肺炎支原体P1重组蛋白的提取纯化及应用研究

作     者：宋焕景 王桂珍 董占双 刘忠顺 吉兆华 周吉海 SONG Huan-jing;WANG Gui-zhen;DONG Zhan-shuang;LIU Zhong-shun;JI Zhao-hua;ZHOU Ji-hai

作者机构：中国医科大学病原生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学公共卫生学院辽宁沈阳110001 

出 版 物：《微生物学杂志》 (Journal of Microbiology)

年 卷 期：2007年第27卷第3期

页      面：107-110页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：辽宁省教委基金项目(2004D226) 

主　　题：肺炎支原体 重组蛋白 酶联免疫吸附实验(ELISA) 

摘      要：提取纯化肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1重组蛋白,建立酶联免疫吸附实验(ELISA)的方法,协助临床肺炎支原体感染的诊断。以GST融合蛋白层析柱提取、纯化Mp P1重组蛋白做抗原,以全肺炎支原体菌体成分做抗原对照,建立间接ELISA实验方法,检测40份正常献血者血清标本和51份疑似MP感染临床血清标本的IgG抗体。重组蛋白经SDS-PAGE可见诱导表达的样品在分子量大约59 ku处有明显条带,经Western blotting可与肺炎支原体免疫血清发生反应。ELISA实验检测51份临床标本,由P1重组蛋白抗原检测阳性31份,阳性率为60.78%。Mp检测阳性20份,阳性率为39.22%。实验精确度检测阳性混合血清的变异系数(CV值)为5.40%,阴性混合血清变异系数为1.10%。用Mp P1重组蛋白抗原建立的ELISA检测方法,其敏感性高于全肺炎支原体抗原,可用于临床肺炎支原体感染的诊断。