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生物素胺(神经生物素^(TM))细胞内染色法与辣根过氧化物酶逆行标记法的结合──研究神经元通路的一个可靠方法

INTRACELLULAR BIOTINAMIDE (NEUROBIOTIN ̄(TM))STAINING COMBINED WITH RETROGRADE HORSERADISH PEROXIDASE LABELING ── A RELIABLE MEANS TO DETECT NEURONAL PATHWAYS

作     者:罗丕福 

出 版 物:《神经解剖学杂志》 (Chinese Journal of Neuroanatomy)

年 卷 期:1996年第12卷第4期

页      面:303-316页

学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 071006[理学-神经生物学] 

主  题:神经通路 神经解剖学技术 生物素胺 细胞染色 

摘      要:本文阐明了利用细胞内神经生物素(Neurobiotin)染色与HRP逆行追踪相结合的方法,研究大鼠三叉神经本体感觉的传导通路.首先将HRP分别注射于或微电泳亚对侧丘脑腹后内侧核和后核群,同侧颈髓C2~C4平面;同侧闭口肌或同侧三叉神经运动核。24~48小时后,用电生理的方法鉴定1~5根闭口肌肌梭传入轴突,分别于细胞内注射神经生物素。HRP用TMB成色并以钨酸钠作为稳定剂,神经生物素用免疫组化的方法显示.待HRP和神经生物素呈色后光镜下发现;在三叉神经运动核,三叉神经感觉核簇和邻近网状结构的HRP逆行标记细胞被神经生物素细胞内染色的肌梭传入终扣紧密相贴(Apposition).这些紧密相贴的结构在电镜下证实为细胞内染色的终扣和HRP逆行标记细胞的胞体和的突之间的突触联系.因此,这些HRP标记的神经元分别中继来自闭口肌肌梭的三叉神经本体感觉信息至丘脑、颈髓和三叉神经运动核等,分别形成三叉-丘脑和三叉-颈髓的本体感觉传导通路以及与三叉神经运动核之间的直接联系.细胞内神经生物素注射与HRP逆行追踪相结合的方法提供了一种追踪中枢神经系统神经环路和神经通路的可靠手段.本方法优越于亲神经病毒追除、原癌基因表达以及神经元溃?

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