RNA干扰YAP基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响

作     者：花开尧 宋洪明 宋佳璐 李登峰 房林 HUA Kai-yao;SONG Hong-ming;SONG Jia-lu;LI Deng-feng;FANG Lin

作者机构：同济大学附属第十人民医院甲状腺乳腺外科上海200072 

出 版 物：《同济大学学报（医学版）》 (Journal of Tongji University(Medical Science))

年 卷 期：2016年第37卷第1期

页      面：12-17页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81272240) 

主　　题：乳腺肿瘤 Yes相关蛋白 siRNA 细胞功能 

摘      要：目的探讨RNA干扰YAP基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响。方法使用阳离子脂质体转染试剂LipofectamineTM2000将靶向沉默YAP基因的siRNA序列转染至乳腺癌M DA-M B-231细胞中,采用qRT-PCR和Western印迹法分别检测转染后MDA-MB-231细胞中YAP基因及蛋白的表达水平,噻唑蓝(MTT)实验和细胞平板克隆实验检测转染前后细胞增殖的变化,Transwell小室和划痕实验观察转染对细胞侵袭及迁移的影响,流式细胞术评价转染后细胞周期及凋亡的变化情况。结果转染siRNA后,YAP RNA和蛋白的表达量相对于空白对照及阴性对照组均明显下降(P0.01)。MTT实验及细胞平板克隆实验显示,siRNA干扰YAP表达可以显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖活性;Transwell小室及划痕试验显示,siRNA干扰YAP的表达可以明显抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭及迁移能力;细胞周期实验显示,沉默YAP后,细胞周期出现G0/G1期阻滞,细胞凋亡检测证实沉默YAP后细胞凋亡率并未出现明显上升。结论抑制YAP在乳腺癌细胞的表达可有效降低细胞的增殖、迁移和侵袭能力,改变细胞周期分布,但对细胞凋亡无明显影响。