大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和生物学特性研究

作     者：荣良群 叶英 曾因明 刘福民 戴如飞 万美荣 RONG Liang-qun;YE Ying;ZENG Yin-ming;LIU Fu-min;DAI Ru-fei;WAN Mei-rong

作者机构：徐州医学院第二附属医院神经外科221002 徐州医学院附属医院江苏省麻醉学承点实验室 中国医科大学第一临床学院麻醉科 徐州医学院附属医院中心实验室 

出 版 物：《国际麻醉学与复苏杂志》 (International Journal of Anesthesiology and Resuscitation)

年 卷 期：2009年第30卷第5期

页      面：386-389页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

主　　题：骨髓间充质干细胞 体外分离培养 鉴定 

摘      要：目的探讨体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞（bone mallow mesenchymal stem cells，BMSCs）的方法，并研究其生物学特性。方法取大鼠股骨和胫骨，以Fieoll密度梯度离心法结合贴壁法分离纯化大鼠BMSCs，传代扩增，倒置显微镜进行细胞形态学观察，MTT法测定细胞的生长曲线，流式细胞仪细胞表面抗原。结果原代分离的BMSCs，培养48h开始贴壁，胞体由圆形变为椭圆形、多角形或短梭型；培养第12天，见胞体渐变为长梭型，并达90％单层融合；经传代扩增，细胞进一步纯化。7代以前，细胞在2d内处于潜伏期，第3天进入对数生长期，第7天进入平台期；10代后增殖速度变慢；流式细胞仪鉴定BMSCs表面抗原，CD44、CD90、CD34阳性率分别为99．62％、95．13％、2．06％。结论Ficoll密度梯度离心法结合贴壁法有效分离纯化大鼠BMSCs，且细胞生长稳定，增值能力活跃，具有MSCs的一般生物学特性。