弓形虫复合基因SAG1-BAG1的构建、表达及重组抗原的免疫反应性分析

作     者：秘文婷 姚硕 钟志刚 杨培梁 吴焜 陈晓光 MI Wen-ting;YAO Shuo;ZHONG Zhi-gang;YANG Pei-liang;WU Kun;CHEN Xiao-guang

作者机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系广东广州510515 

出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期：2012年第12卷第5期

页      面：620-622页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：广东省自然科学基金(8451051501000253) 广东省科技计划项目(2008A060202021) 广东省大学生创新实验项目(1212110025 1212110027) 南方医科大学学生课外科研项目(2009kw092 2009kw093) 

主　　题：弓形虫 复合基因 SAG1 BAG1 蛋白表达 

摘      要：目的构建并表达弓形虫复合基因SAG1-BAG1及分析重组抗原的免疫反应性。方法利用PCR扩增弓形虫SAG1基因,利用RT-PCR扩增弓形虫BAG1基因,通过酶切连接分别将SAG1、BAG1基因克隆到pET28a表达载体中构建复合基因SAG1-BAG1。将质粒pET28a-SAG1-BAG1转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,Western-blot分析该重组蛋白的免疫反应性。结果复合基因SAG1-BAG1全长约1 407 bp,重组蛋白相对分子质量约为50 000,表达量约占菌体总蛋白的10%,Western-blot分析显示重组蛋白具有良好的免疫反应性。结论成功构建并表达弓形虫复合基因SAG1-BAG1。