下调53BP1基因表达对喉部鳞癌细胞放射增敏作用的研究

作     者：苟启桁 谢钰鑫 伍艳霞 王前前 王竹 李平 GOU Qi-heng;XIE Yu-xin;WU Yan-xia;WANG Qian-qian;WANG Zhu;LI Ping

作者机构：四川大学华西医院肿瘤中心成都610041 四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室成都610041 四川大学华西医院肿瘤分子诊断实验室成都610041 

出 版 物：《四川大学学报（医学版）》 (Journal of Sichuan University(Medical Sciences))

年 卷 期：2014年第45卷第5期

页      面：754-759页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：四川省科技厅支撑计划(No.2009SZ0160)资助 

主　　题：P53结合蛋白1基因(53BP1) 周期阻滞 放射敏感性 RNA干扰 

摘      要：目的利用RNA干扰技术下调喉部鳞癌Hep-2细胞株P53结合蛋白1基因(53BP1)的表达,观察其对肿瘤细胞周期及放疗敏感性的影响。方法构建53BP1短发夹RNA(shRNA)重组质粒,然后转染Hep-2细胞株,构建稳定低表达53BP1的Hep-2细胞系,通过Western blot检测转染空载质粒的Hep-2细胞(NC)、野生型Hep-2细胞(未转染,Hep-2组)和稳定转染下调53BP1表达的Hep-2细胞组(P6组)细胞53BP1蛋白的表达水平,MTT法检测转染对细胞正常情况下增殖的影响,通过流式细胞术检测经放射线照射后的细胞周期分布,并采用克隆形成实验检测下调53BP1表达的Hep-2细胞系对放射的敏感性变化。结果成功构建了稳定低表达53BP1的Hep-2细胞株P6,Western blot显示P6组Hep-2相较野生型Hep-2细胞中53BP1蛋白水平下降(P0.05)。MTT结果示下调53BP1蛋白表达并未影响细胞正常的生长。P6组下调53BP1后,经不同剂量放射后G2/M期周期阻滞较NC组和野生型Hep-2细胞减弱(P0.05),周期阻滞比例随放射剂量增加而增加。在0、2、6、10Gy剂量的照射后,P6组放射敏感参数(D0、N、Dq、SF2)均低于野生型Hep-2组和对照组(P0.05)。结论 RNA干扰可下调53BP1表达的Hep-2细胞,减少G2/M周期阻滞,从而增强对放射的敏感性。