乳腺癌雌激素受体β不同亚型表达载体的构建及其转录活性分析
Eukaryotic Expression Vectors Construction and Transcriptional Ac tivity Analysis of Different Isoforms of ERβ in Breast Cancer作者机构:军事医学科学院生物工程研究所北京100850 安徽医科大学附属安庆市立医院口腔科安徽安庆246600 北京王府中西医结合医院药剂科北京102209
出 版 物:《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)
年 卷 期:2013年第24卷第4期
页 面:471-473,518页
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
摘 要:目的:构建人乳腺癌中雌激素受体β(ERβ)3种亚型ERβ1、ERβ2和ERβ5的真核表达载体,测定不同亚型ERβ的转录活性。方法:以乳腺癌细胞MCF7的cDNA为模板,PCR扩增ERβ1、ERβ2和ERβ5基因,分别克隆到pXJ40-Myc载体,Western印迹检测克隆载体在293T细胞内的表达;将上述载体与含雌激素应答元件(ERE)的萤光素酶(Luc)报告基因载体(ERE-luc)共转293T细胞,测定各亚型ERβ的转录活性。结果:构建了Myc-ERβ1、Myc-ERβ2和Myc-ERβ5表达载体,转录活性结果显示上述表达载体均具有活性,雌激素可升高ERβ1的转录活性,不能升高ERβ2和ERβ5的转录活性。结论:该研究为进一步探讨不同亚型ERβ在乳腺癌中的功能奠定了基础。