体外扩增脐血间充质干细胞的生物学特性和诱导分化能力的研究

作     者：鞠秀丽 黄志伟 时庆 侯怀水 段春红 JU Xiu-li;HUANG Zhi-wei;SHI Qing;HOU Huai-shui;DUAN Chun-hong

作者机构：山东大学齐鲁医院儿科济南250012 

出 版 物：《中华儿科杂志》 (Chinese Journal of Pediatrics)

年 卷 期：2005年第43卷第7期

页      面：499-502页

核心收录：

学科分类：1003[医学-口腔医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学] 

基　　金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金资助项目(03BS022) 

主　　题：间充质干细胞 生物学特性 分化能力 扩增脐血 体外培养扩增 细胞化学染色 MSCs 密度梯度离心法 DMEM培养基 显微镜下观察 细胞免疫表型 体外诱导分化 非特异性酯酶 分化潜能 成骨细胞 脂肪细胞 单个核细胞 新生儿脐血 流式细胞仪 

摘      要：目的从脐血中分离单个核细胞(MNCs),体外培养扩增间充质干细胞(MSCs)并研究其生物学特性和诱导分化潜能。方法取35份足月顺产新生儿脐血,密度梯度离心法分离出其中的MNCs,采用含胎牛血清的DMEM培养基体外培养扩增MSCs。显微镜下观察MSCs的形态、细胞化学染色,流式细胞仪测定MSCs的细胞免疫表型,体外诱导分化实验检测MSCs分化成骨细胞、脂肪细胞和神经细胞的能力。结果从12份脐血中可培养出MSCs,形态上与从其他来源的MSCs类似,可传至20代而无形态上的变化。细胞化学染色示碱性磷酸酶(ALP)阴性,非特异性酯酶———α丁酸萘酚酯酶(alphanaphtholbutyricacidesterase,NBE)阳性。其表达CD29、CD44和CD105,特别是人类MSCs标记SH2和SH3阳性,而CD3、CD14、CD19、CD34和CD45阴性,说明它们并非来自造血细胞。这些MSCs在适当诱导分化剂的作用下,2周左右可以诱导分化形成骨细胞,20天左右可以诱导分化形成脂肪细胞。脐血MSCs预诱导12h后,胞体发生收缩,细胞边缘有细的突起。正式诱导5h后大多数细胞呈现典型的神经元样。结论胎儿脐血MNCs可分离培养出MSCs。这些MSCs具有与其他来源MSCs类似的表型及分化潜能。