蛋白转导结构域-bcr/abl融合基因的构建和表达

作     者：梁英民 孙强 蒋姗姗 王冀姝 吴绒丽 陈萍 刘利 韩骅 Edwin Hsun-Kao Yen

作者机构：第四军医大学唐都医院血液科西安710038 第四军医大学遗传与发育生物学教研室 

出 版 物：《中华血液学杂志》 (Chinese Journal of Hematology)

年 卷 期：2002年第23卷第1期

页      面：5-8页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(39730270) 上海市教委资助项目(2000B101) 

主　　题：遗传转导 bcr/abl融合基因 白血病 慢性 基因表达 大肠杆菌 

摘      要：目的 构建含蛋白转导结构域 (PTD)与慢性粒细胞白血病 (CML)bcr/abl融合基因片段的质粒 ,并在大肠杆菌中表达。方法 PCR扩增的CMLbcr/abl基因片段 ,经DNA测序后 ,与合成编码PTD的DNA片段一起插入质粒pET 16b ,构建表达载体pEPb ,转化大肠杆菌并进行了PTD bcr/abl蛋白的诱导表达和纯化。结果 跨越bcr/abl断裂点的 5 2 3bp的目的片段被有效地扩增。DNA序列分析表明所构建的含PTD bcr/abl融合基因的质粒与设计相同。PTD bcr/abl融合蛋白在转化大肠杆菌获得了高效表达并纯化。结论 成功地获得了PTD bcr/abl融合蛋白片段的基因表达产物 。