MG_7胞内抗体的表达及活性鉴定

作     者：喻召才 丁杰 樊代明 张学庸 

作者机构：第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所陕西西安710032 

出 版 物：《免疫学杂志》 (Immunological Journal)

年 卷 期：2001年第17卷第6期

页      面：410-412页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：军队"九五"医药卫生基金资助项目 (96 2 0 47) 

主　　题：胞内抗体 MG7 基因治疗 胃癌 

摘      要：目的制备 MG7胞内抗体并鉴定其分子量和抗原结合活性。方法以含 MG7sc Fv基因的质粒 p CANTAB5 E为模板 ,PCR扩增 MG7sc Fv基因 ,并在其 3’端引入一段内质网滞留序列 (SEKDEL ) ,即形成 MG7胞内抗体基因。 DNA测序后 ,将 MG7胞内抗体基因克隆到表达载体 p GEX- 3X中 ,转化宿主菌 HB2 15 1,IPTG诱导 ,SDS- PAGE分析产物分子量 ,EL ISA检测产物的 MG7抗原结合活性。结果电泳分析发现融合基因片段长约 780 bp。DNA序列分析显示 ,SEKDEL与 MG7sc Fv基因正确融合 ;SDS- PAGE分析发现 MG7胞内抗体的分子量为 32 0 0 0 u;EL ISA检测发现 MG7胞内抗体具有明显的抗原结合活性。结论我们成功地制备并表达了 MG7胞内抗体 ,为利用其探讨