液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测血浆肾素活性(PRA)的方法学建立和临床应用评估

作     者：徐雯 虞倩 陈方俊 秦嘉倩 潘柏申 郭玮 卞华 王蓓丽 XU Wen;YU Qian;CHEN Fang-jun;QIN Jia-qian;PAN Bai-shen;GUO Wei;BIAN Hua;WANG Bei-li

作者机构：复旦大学附属中山医院检验科上海200032 复旦大学附属中山医院内分泌科上海200032 

出 版 物：《复旦学报（医学版）》 (Fudan University Journal of Medical Sciences)

年 卷 期：2019年第46卷第1期

页      面：70-78页

核心收录：

学科分类：100208[医学-临床检验诊断学] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：上海市卫生计生系统重要薄弱学科建设项目(2015ZB0201) 上海市卫计委科研课题(201440389) 上海市科委科研项目(16411952100) 国家自然科学基金面上项目(81572064 81772263)~~ 

主　　题：血浆肾素活性(PRA) 液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS) 原发性醛固酮增多症(PA) 

摘      要：目的建立高血压患者血浆肾素活性(plasma renin activity,PRA)液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)的检测方法,用于早期筛查高血压患者中的原发性醛固酮增多症(primary aldosteronism,PA)。方法 arginine 13 C 15 N作为内标,采用Phenomenex Kinetex C18柱(2.6μm,100 mm×3.0mm)进行分离,柱温55℃。流动相为0.2%甲醇水溶液和0.2%甲酸甲醇溶液,流速为0.5 mL/min,梯度洗脱。考察该方法的特异性、基质效应、携带污染、重复性、定量下限(lower limit of measuring interval,LLMI)、线性、不精密度、回收率、稀释一致性和血浆标本稳定性。采用LC-MS/MS方法测定296名表面健康人群(男性153名,女性143名,平均年龄48岁)及360名高血压患者(平均年龄52岁,确诊为PA27例)的血浆样本PRA,并与放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)进行比较。结果该方法通过了特异性、基质效应、携带污染、重复性的性能评价。PRA的检测线性范围为0.084 4～30.0000ng/mL;PRA的LLMI为0.084 4ngmL-1h-1;日间和批内的不精密度变异系数(coefficient of variation,CV)均15%;准确度偏差均15%,回收率为92.28%～102.62%;建立的生物参考区间为0.25～5.12 ngmL-1h-1(立位);与RIA比较,结果相关性较好(r2=0.81,P0.05),但存在-18.5%的偏倚;LC-MS/MS所得PRA的醛固酮/肾素活性比值(aldosterone to renin ratio,ARR)对PA的诊断特异性与灵敏度分别为96.3%与91.0%,诊断性能更佳(AUC:0.983 vs.0.894)。结论我们建立了准确检测PRA的LC-MS/MS方法,适合于临床早期快速筛查PA。