农杆菌介导薄皮甜瓜遗传转化体系建立
Establishment of Agrobacterium mediated genetic transformation system of muskmelon作者机构:农业部东北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室哈尔滨150030 东北农业大学园艺园林学院哈尔滨150030
出 版 物:《东北农业大学学报》 (Journal of Northeast Agricultural University)
年 卷 期:2019年第50卷第1期
页 面:11-18页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 090102[农学-作物遗传育种]
基 金:国家西甜瓜产业技术体系项目(CARS-25) 国家自然科学基金项目(31772331)
摘 要:以薄皮甜瓜M15和M43子叶节为外植体,研究激素浓度、卡那霉素浓度和消毒时间等对甜瓜子叶节再生及农杆菌介导遗传转化的影响。结果表明,诱导甜瓜子叶节不定芽分化最佳激素组合为0.5 mg·L^(-1)6-BA+0.05 mg·L^(-1)IAA,芽伸长激素为0.05 mg·L^(-1)6-BA,生根激素为0.1 mg·L^(-1)IAA。农杆菌介导甜瓜转化最佳条件为预培养48 h,OD_(600)=0.6农杆菌菌液侵染15 min,黑暗条件下共培养48~72 h,头孢抑菌浓度500 mg·L^(-1),卡那霉素浓度75 mg·L^(-1)。PCR检测卡那霉素抗性苗,验证外源基因已整合进入甜瓜基因组,M15和M43抗性植株阳性率分别为84.2%和77.4%。