苦柯胺B对脂多糖诱导的脓毒症小鼠小肠炎症反应的抑制作用及分子机制

作     者：吕汪洄 秦魏婷 张锦丽 沈唯长 王旭 孙炳伟 Lyu Wanghui;Qin Weiting;Zhang Jinli;Shen Weichang;Wang Xu;Sun Bingwei

作者机构：江苏大学附属医院烧伤整形科江苏镇江212001 

出 版 物：《中华危重病急救医学》 (Chinese Critical Care Medicine)

年 卷 期：2015年第27卷第2期

页      面：121-126页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 1011[医学-护理学（可授医学、理学学位）] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：基金项目:国家自然科学基金(30772256,81071546,81272148) 江苏省自然科学基金(BK2012703) 

主　　题：脂多糖 苦柯胺B 小肠 炎症反应 

摘      要：目的 探讨苦柯胺B（KB）对脓毒症小鼠小肠炎症反应的抑制作用及其分子机制。方法 按照随机数字表法将24只雄性ICR小鼠分为对照组、模型组、KB干预组，每组8只。腹腔注射脂多糖（I^PS）20mg／kg制备脓毒症动物模型，对照组注射等量生理盐水；KB干预组于制模后4h经尾静脉注射KB20雌mg进行干预。各组于注射LPS后8h取心脏血和空肠、回肠组织，检测血浆LPS含量；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆及小肠组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α,）和白细胞介素-1β（IL-1β）水平；光镜下观察小肠组织病理学改变；比色法检测小肠组织髓过氧化物酶（MPO）活性；免疫组化法观察小肠组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达；反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测小肠组织诱导型-氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达；蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测小肠组织核转录因子-kB（NF—kB）蛋白表达。结果 模型小鼠表现为肠组织微血管通透性增加，间质水肿，白细胞浸润；血浆LPS、TNF-α、IL—1β水平及小肠TNF-α、IL-1β、MPO活性、ICAM-1阳性表达、iNOS mRNA、NF—kB蛋白表达均明显升高；而经KB干预后，小肠组织微血管通透性降低，水肿程度减轻，白细胞浸润显著减少，血浆LPS、TNF-α、IL-1β及小肠TNF-α、IL-1β、MPO活性、ICAM-1阳性表达、iNOSmRNA和NF—kB蛋白表达均较模型组均明显下降[血浆LPS（kEU／L）：654．09±28．13比1155．65±47．15，TNF—α（ng／L）：12．75±0．47比30．61±0．71，IL-1β（ng／L）：53．06±5．32比64．47±2．61；空肠TNF-α（ng／L）：43．27±1．20比64．82±2．09，IL-1β（ng／L）：326．38±14．47比535．22±***（U，g）：0．14±0．01比0．32±0．02，iNOSmRNA（2^-△△Ct）：2．39±0．13比10．80±0．22，NF—kB蛋白（灰度值）：0．687±0．062比1．404±0．046；回肠TNF-α（ng／L）：62．75±3．92比104．24±2．82，IL-1B（ng／L）：408．06±1．70比521．97±1．16，MPO（U／g）：0．36±0．08比0．66±0．05，iNOSmRNA（2--△△Ct）：1．65±0．11比3．59±0．29，NF—kB蛋白（灰度值）：0．830±0．114比1．609±0．051，均P〈0．05]。结论 KB可以通过结合LPS，抑制LPS／Toll样受体4（TLR4）信号通路活化，从而显著抑制LPS诱导的脓毒症小鼠小肠炎症反应，保护小肠功能。