从纤支镜刷落细胞提取微量RNA并检测Foxp3基因表达

作     者：王琦 张行 周畔 张敷彪 曹江 

作者机构：浙江大学邵逸夫医院临床医学研究所浙江杭州310016 

出 版 物：《全科医学临床与教育》 (Clinical Education of General Practice)

年 卷 期：2008年第6卷第3期

页      面：204-206,210,F0002页

学科分类：1002[医学-临床医学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100215[医学-康复医学与理疗学] 10[医学] 

主　　题：纤维支气管镜 刷落细胞 微量RNA提取 Foxp3 

摘      要：目的建立纤维支气管镜刷落细胞提取微量核糖核酸(RNA)的方法,检测分析调节性T细胞(Treg)Foxp3基因在肺癌及肺良性疾病患者中的表达水平。方法以磁珠吸附法提取154例肺癌及肺良性疾病患者纤支镜刷脱细胞的微量RNA,以实时荧光定量RT-PCR的方法检测Treg特异性转录因子Foxp3基因在肺癌及肺良性疾病患者中的表达水平。结果平均总RNA提取量为5.08μgRNA/例,最低为3.20μg,最高为15.25μg。肺癌患者组中Foxp3 mRNA的表达水平(0.0000～13682.0805,四分位数间距0.0011)显著高于肺良性疾病组(0.0000～0.0061,四分位数间距0.0000)(Z=-3.508,P0.01),肺癌患者组中Foxp3的阳性率(29.34%,27/92)亦明显高于肺良性疾病组(3.23%,2/62)(χ2=16.535,P0.01)。结论利用纤支镜毛刷刷取病灶部位涂片后毛刷中的剩余细胞,采用磁珠吸附的方法可以提取微量RNA,并用于基因表达水平的检测。