C6细胞中诱导体外培养大鼠神经干细胞迁移蛋白的初步分析

作     者：高宜录 李传友 林社裕 沈剑虹 刘梅 Gao YL;Li CY;Lin SY;Shen JH;Liu M

作者机构：南通大学附属医院神经外科江苏省南通市226001 河南省新乡市中心医院神经外科河南省新乡市453000 南通大学江苏省神经再生重点实验室江苏省南通市226001 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2007年第11卷第46期

页      面：9230-9233页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：江苏省自然科学基金资助项目(BK2002145) 江苏省神经再生重点实验室开放课题(MN02-05)资助项目~~ 

主　　题：神经干细胞 C6细胞 星形胶质细胞 细胞迁移 

摘      要：目的:许多体内实验表明神经干细胞具有向胶质瘤细胞迁移的特性,该特性使神经干细胞有可能成为基因治疗脑胶质瘤潜在的基因携带者。实验拟观察大鼠星形胶质瘤C6细胞诱导体外培养的大鼠神经干细胞的迁移作用,并初步分离C6细胞中诱导神经干细胞迁移的蛋白。方法:实验于2005-01/2006-05在南通大学江苏省神经再生重点实验室完成。实验材料:C6细胞用含10%小牛血清的DMEM/F12培养基进行培养,使用时细胞处于对数生长期。清洁级的新生1周内的SD大鼠由南通大学实验动物中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。实验方法:从新生5～7dSD大鼠大脑皮质分离培养、纯化神经干细胞。从SD新生红皮鼠大脑皮质分离、培养、纯化星形胶质细胞。采用TranswellInserts细胞培养室培养系统共培养36h,比较C6细胞和大鼠星形胶质细胞对体外培养的大鼠神经干细胞的迁移作用;自然系统聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳分离C6细胞和星形胶质细胞差异蛋白,观察各蛋白凝胶条带对神经干细胞的迁移作用。结果:体外培养C6细胞能诱导神经干细胞迁移,迁移细胞数目与星形胶质细胞相比,差异有显著意义(P0.001)。将C6细胞中差异蛋白条带与神经干细胞共培养,与对应的星形胶质细胞蛋白条带相比,可观察到与相对分子质量约67000蛋白胶条共培养的神经细胞球在接近蛋白胶条的一侧细胞向胶条迁移生长。结论:C6细胞可以诱导体外培养的神经干细胞迁移,其总蛋白在自然系统聚丙烯酰胺凝胶电泳分离实验中获得的相对分子质量为67000的蛋白组分具有诱导神经干细胞迁移的活性。