脂肪酶1在毕赤酵母中的高效表达

作     者：贝锦龙 王瑾雯 王珣章 龙綮新 杨林 邓莹煜 BEI Jin-Long, WANG Jin-Wen, WANG Xun-Zhang * , LONG Qin-Xing, YANG Lin, DENG Ying-Yu ( The State Key Laboratory for Biological Control, Biopharmaceutical Center, Zhongshan University, Guangzhou 510275, China )

作者机构：中山大学生物防治国家重点实验室、生物医药中心 中山大学生物防治国家重点实验室、生物医药中心 广州510275 

出 版 物：《生物化学与生物物理学报》 (Acta Biochimica Et Biophysica Sinica)

年 卷 期：2003年第35卷第4期

页      面：366-370页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：广东省自然科学基金资助项目 (No .0 0 12 2 7)~~ 

主　　题：人工合成 褶皱假丝酵母脂肪酶(CRL) 脂肪酶1(LIP1) 毕赤酵母 组成型表达 

摘      要：根据褶皱假丝酵母脂肪酶CRL中LIP1的成熟多肽序列 ,人工合成了由毕赤酵母 (Pichiapastoris)中偏爱密码子组成的lip1基因序列。该基因以N端融合的方式分别正确插入毕赤酵母诱导型表达载体pPICZαA与组成型表达载体pGAPZαA中。通过电激将线性化的上述两种重组质粒分别转化毕赤酵母SMD116 8H细胞 ,筛选获得两株分别具有诱导型表达和组成型表达生物活性LIP1能力的高产菌株。其中 ,组成型表达菌株CHT II换液后 4 8h上清液中含脂肪酶活力为 2 .0 0× 10 5u/L ,表达产物在pH 4～ 8与温度 30～ 5 0℃范围内具有较高的脂肪酶活性 ;高密度发酵条件下 ,发酵 72h ,上清液中含脂肪酶活力可达 1.395× 10 6u/L ,表明构建的重组菌株具有更大的工业化生产优势。