禽偏肺病毒RT-PCR检测方法的建立及应用
Establishment and application of a RT-PCR method for detection of avian metapneumovirus作者机构:山东农业大学动物科技学院山东泰安271018
出 版 物:《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)
年 卷 期:2012年第32卷第7期
页 面:971-974,996页
核心收录:
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:山东省科技发展计划资助项目(2010GNC10912)
摘 要:根据GenBank中已经发表的B亚型禽偏肺病毒(aMPV)F基因的保守序列设计并合成1对引物,利用RT-PCR可以扩增出1条725bp的片段,进行特异性试验和敏感性试验,建立了禽偏肺病毒病的RT-PCR检测方法。特异性试验表明,建立的RT-PCR检测方法能够从禽偏肺病毒疫苗毒株VIR 115-B中扩增到725bp的特异性片段,而对H9N2亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒的扩增结果均为阴性;敏感性试验表明,该方法最低检出量的cDNA质量浓度为1.45μg/L;对山东省492份病料进行检测,阳性检出率为43.09%(212/492),随机挑取11份进行克隆测序及序列分析,结果显示所扩增到的阳性产物均为B亚型的禽偏肺病毒。建立的禽偏肺病毒的RT-PCR检测方法具有快速、准确、特异性强、敏感性高的特点。