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研制14型肺炎链球菌培养基和优化其荚膜多糖提纯的工艺

Develop a culture medium for Streptococcus pneumonia serotype 14 and improved the purification of its capsular polysaccharide

作     者:姬泽薇 陈守义 毕晓云 胡勇 JI Ze-wei;CHEN Shou-yi;BI Xiao-yun;HU Yong

作者机构:广州精达医学科技有限公司广东广州510530 中山大学公共卫生学院广东广州510080 广州市疾病预防控制中心广东广州510440 广州经济技术开发区医院检验科广东广州511356 

出 版 物:《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期:2012年第12卷第4期

页      面:394-397页

学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基  金:广州开发区中山大学生物工业研究院项目(2010SOY004) 广州开发区科技计划项目(2010Q-P427) 

主  题:14型肺炎链球菌 荚膜多糖 培养基 纯化 

摘      要:目的研制国产培养14型肺炎链球菌的培养基,然后制备和纯化该菌的荚膜多糖,并对其全过程的工艺进行优化。方法测试添加不同种血清、培养基成分对肺炎链球菌生长的影响,在此基础上对比进口培养基和本实验自制培养基培养细菌的效果。测试不同裂解细菌方案对获得荚膜多糖多少的影响,并比较DNA酶和RNA酶酶解方法和常规乙醇沉淀方法去除残留核酸的效果。结果实验室自配培养基与进口培养基均能使肺炎链球菌较好生长。用1%NP40加胰酶的裂解方法可使多糖从细菌菌体更好的释放,使用DNA酶和RNA酶去除残留核酸,在多糖产量和核酸去除效率方面都取得了较好的结果,再进一步纯化后可以得到较纯的多糖。结论本文在培养基国产化、菌体裂解后多糖释放和核酸去除三大方面为肺炎球菌荚膜多糖提取提供了有效可行的方案。

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