用单性结实基因2A11-iaaM转化罗汉果的研究

作     者：周琼 胡姗姗 郝庆林 莫燕梅 李刚 唐美琼 辛佳佳 宁弋珍 Zhou Qiong;Hu Shanshan;Hao Qinglin;Mo Yanmei;Li Gang;Tang Meiqiong;Xin Jia;Ning Yizhen

作者机构：广西大学农学院南宁530004 广西药用植物园广西药用资源保护与遗传改良重点实验室南宁530023 

出 版 物：《广西植物》 (Guihaia)

年 卷 期：2018年第38卷第12期

页      面：1614-1625页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(31260359) 广西大学博士启动项目(XBZ110586)~~ 

主　　题：罗汉果 单性结实 转基因 遗传转化 

摘      要：为了实现罗汉果生产中免除人工授粉和果实无籽化,该研究利用pBI121-Gus构建果实特异启动子2A11与生长素合成相关基因iaaM的嵌合基因(2A11-iaaM)过量表达载体,以罗汉果雌株叶盘为材料,采用农杆菌介导法建立罗汉果高效遗传转化体系,转化和创制单性结实罗汉果种质,通过基因特异引物对的PCR扩增,初步检测出转基因阳性植株,将之移栽大田,观察转基因植株的单性结实性的表现。结果表明:构建罗汉果单性结实性相关的pBAI-Gus植物双元表达载体获得成功;建立了农杆菌介导的罗汉果叶盘遗传转化优化体系,即农杆菌菌液OD_(600)值为0.3～0.5,侵染10 min,最优选择培养基为MS+TDZ 0.7 mg·L^(-1)+IBA 0.5 mg·L^(-1)+Kan 5 mg·L^(-1)+Cef 300 mg·L^(-1);经PCR鉴定共获得4株转基因阳性雌株;将阳性植株扩繁后移栽田间,经田间调查发现,24株阳性扩繁植株中有5株正常开花,占总植株数的20.8%,且其子房未经人工授粉发育成幼果,表现单性结实性。在载体构建和农杆菌介导的罗汉果遗传转化体系优化的基础上,将外源单性结实相关嵌合基因整合进罗汉果基因组并得到表达,为后续研究单性结实罗汉果的遗传生理,创制转基因罗汉果单性结实新种质,以及克服其产业化中需要人工授粉和无籽化提供了理论和应用基础。