机械牵张力改变诱导YAP蛋白下调参与升主动脉瘤的发生

作     者：姜文剑 李海洋 王晓龙 张宏家 JIANG Wenjian;LI Haiyang;WANG Xiaolong;ZHANG Hongjia

作者机构：首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所心脏外科北京市心肺血管疾病研究所心血管疾病精准医学北京实验室北京大血管疾病诊疗中心北京市大血管外科植入式人工材料工程技术研究中心100029 

出 版 物：《心肺血管病杂志》 (Journal of Cardiovascular and Pulmonary Diseases)

年 卷 期：2019年第38卷第1期

页      面：85-92页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81800404 81470580) 心血管疾病精准医学北京实验室(PXM2017_014226_000037) 北京市优秀人才培养资助青年骨干个人项目(2017000021469G254) 首都卫生发展科研专项项目-青年优才(2018-4-2068) 北京市医院管理局青年人才培养"青苗"计划(QML20180601) 

主　　题：YAP蛋白 升主动脉瘤 细胞外基质 血管平滑肌细胞 凋 

摘      要：目的:研究YAP蛋白在升主动脉瘤(AAA)的发病中是否发挥作用。方法:研究对象由2部分组成:①AAA患者:收集2014年9月至2015年9月,于首都医科大学附属北京安贞医院接受单纯升主动脉替换或者合并升主动脉替换手术的AAA患者以及接受心脏移植手术患者的标本;②使用cyclic stretch拉伸仪拉伸细胞以构建细胞凋亡模型。应用弹力板染色、免疫组化、免疫荧光和Tunel染色观察主动脉壁组织的形态学,Western blotting检测主动脉壁组织及主动脉平滑肌细胞株中YAP在蛋白水平的表达。结果:①弹力板染色、免疫组化和Tunel染色结果显示:AAA患者主动脉壁组织细胞外基质异常,且主动脉壁血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡增多。②免疫组化染色和免疫荧光染色结果显示:AAA患者主动脉壁组织中VSMCs凋亡增多,免疫荧光染色的统计分析结果显示:AAA患者的主动脉壁组织中VSMCs的凋亡较正常主动脉壁组织显著增多(P0.05)。③Western blotting检测、免疫组化染色和免疫组化染色结果显示,与正常主动脉壁组织相比,AAA患者主动脉壁组织中血管平滑肌中的YAP蛋白表达量显著降低;计算机软件分析Western blotting结果的蛋白灰度显示YAP蛋白的表达量降低近90%,统计结果显示差异有统计学意义(P0.05);免疫荧光染色结果显示:AAA患者的主动脉壁组织中VSMCs的凋亡较正常主动脉壁组织显著增多(P0.05)。④Western blotting检测结果显示:相对于正常对照组,CRL-1999人主动脉平滑肌细胞株接受Cyclic Stretch机械牵拉36h后,细胞中的YAP蛋白的表达量显著减少,提示人主动脉平滑肌细胞受到机械牵张后会使细胞内的YAP表达量降低,进而发生凋亡。结论:YAP在AAA的发病中发挥重要作用。当升主动脉细胞外基质发生变化时,机械牵张力的改变可以使YAP的表达下调,进而通过促进主动脉血管平滑肌的凋亡参与AAA的发病过程。