牛病毒性腹泻病毒重组E2蛋白PPA-ELISA方法的建立及临床应用

作     者：柴顺秀 马花 韩英 赵隆寿 CHAI Shun-xiu;MA Hua;HAN Ying;ZHAO Long-shou

作者机构：青海省湟中县动物卫生监督所青海湟中811600 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2013年第34卷第6期

页      面：106-110页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主　　题：牛病毒性腹泻病毒 重组E2蛋白 PPA-酶联免疫吸附试验 

摘      要：用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白为包被抗原,辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白(PPA)为二抗,建立了检测BVDV血清抗体的E2-PPA-ELISA方法。研究选取特异性良好的E2抗原,确定了最佳工作条件为:E2蛋白抗原的最适包被质量浓度为16.0μg/mL,酶标二抗的工作浓度为1∶2 000,血清稀释度为1∶40时效果最佳。通过重复性试验、特异性试验和敏感性试验证明,与用BVDV全病毒为抗原的IDEXX ELISA试剂盒相比,建立的E2-PPA-ELISA抗体检测方法具有较好的重复性、敏感性和特异性。对285份不同地区采集的血清样本进行检测,阳性检出率为33.4%,与IDEXX ELISA试剂盒的检出率无明显差异。表明该方法为BVDV的快速诊断和流行病学调查提供一种快速、简便的血清学诊断方法,适合规模化养牛场BVDV的抗体监测以及流行病学调查。