牛c-myc基因的克隆及其在皮肤成纤维细胞中的表达

作     者：肖佳佳 张凤凤 熊显荣 张涌 Jiajia Xiao;Fengfeng Zhang;Xianrong Xiong;Yong Zhang

作者机构：西北农林科技大学动物医学院杨凌712100 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2011年第27卷第6期

页      面：963-968页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 0905[农学-畜牧学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家科技部转基因新品种培育重大专项~~ 

主　　题：牛 c-myc基因 iPS细胞 真核表达 

摘      要：为了构建包含牛c-myc基因编码序列的重组载体,以胎牛原始生殖嵴为材料,用RT-PCR方法克隆出牛c-myc基因的编码序列,将其亚克隆至pMD19-T载体,再从酶切鉴定和测序正确的质粒上切下目的片段,定向克隆到pIRES2-AcGFP1-Nuc表达载体上,挑选序列正确的重组真核表达质粒转染牛皮肤成纤维细胞,用RT-PCR和Western blotting分别检测c-myc mRNA和蛋白的表达。结果表明,从胎牛原始生殖嵴中正确克隆了c-myc基因的全长编码序列,所构建的重组质粒能够在皮肤成纤维细胞中有效表达,为进一步研究c-myc基因功能以及下一步特定因子诱导牛体细胞转变为牛iPS细胞的研究奠定了基础。