与人巨细胞病毒UL128两种不同结构蛋白相互作用蛋白的筛选与分析

作     者：任高伟 崔鑫 马艳萍 齐莹 阮强 孙峥嵘 REN Gao-wei;CUI Xin;MA Yan-ping;QI Ying;RUAN Qiang;SUN Zheng-rong

作者机构：中国医科大学附属盛京医院病毒研究室沈阳110004 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2010年第30卷第8期

页      面：737-742页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30770109) 

主　　题：人巨细胞病毒 UL128 酵母双杂交 人胎脑cDNA文库 

摘      要：目的 利用酵母双杂交系统从人胎脑cDNA文库中筛选与两种不同转录结构的人巨细胞病毒（HCMV）UL128编码蛋白相互作用的蛋白,比较两者相互作用蛋白之间的异同点.方法 通过3＇RACE和5＇RACE技术扩增出两种HCMV UL128片段,其大小分别为519 bp和642 bp,并将其成功构建到酵母诱饵表达载体pGBKT7中.将以上两种酵母表达载体分别转化到酵母菌AH109中,再将文库DNA转化到已含有酵母表达载体的AH109中,筛选与两种片段大小不同的UL128编码蛋白相互作用的人胎脑蛋白,并对筛选得到的阳性克隆进行测序和生物信息学分析.结果 筛出EFEMP2与UL128-519 bp编码蛋白相互作用,THY-1与UL128-642 bp编码蛋白相互作用.结论 成功构建pGBKT7 UL128-519 bp和pGBKT7 UL128-642 bp,并应用酵母双杂交系统分别筛选出EFEMP2和THY-1与UL128-519 bp和UL128-642 bp编码蛋白相互作用,在所筛选得到的相互作用蛋白之间未发现有相同的蛋白,UL128-519 bp和UL128-642 bp所编码的蛋白在HCMV感染致病过程中可能发挥不同的作用.