假密环菌Armillariella tabescens EJLY2098 β-甘露聚糖酶的克隆、表达及性质分析(英文)

作     者：王艳凤 王衡馨 黄小葵 刘大岭 姚冬生 Yanfeng Wang;AdaHangHeng Wong;Xiaokui Huang;Daling Liu;Dongsheng Yao

作者机构：暨南大学微生物生物技术研究所广州510632 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2009年第25卷第6期

页      面：920-926页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 0836[工学-生物工程] 071005[理学-微生物学] 10[医学] 

基　　金：Supported by:Guangdong Province Science&Technology Program(No.2005B200601004)~~ 

主　　题：β-1,4-甘露聚糖酶 Armillariella tabescens EJLY2098 酶学性质 GHF5 

摘      要：本研究利用RT-PCR和RACE技术从Armillariella tabescens EJLY2098(一种食用真菌)中克隆出了β-甘露聚糖酶的全长cDNA,构建到pPICZaA载体上,并在毕赤酵母GS115中表达了含His标签的β-甘露聚糖酶(re-atMAN47)。该酶的全长cDNA共1481bp,编码445个氨基酸,序列分析表明该序列除含有β-甘露聚糖酶结构域外,还含有CBD和GHF5的结构域,因此可被归为糖苷水解酶家族5的一个新成员。诱导培养72h时重组酶活可达到1.067U/mL,蛋白含量为440mg/L。重组酶的最适反应温度为60°C,在30°C～65°C比较稳定;酶促最适pH为5.5、4.5～7.0之间比较稳定。这是首次关于Armillariella. tabescens EJLY2098产β-甘露聚糖酶的报道,得到了一个有较好热稳定性、pH稳定性和生物安全性的糖苷水解酶,将在饲料、食品、药物生产等方面有广泛的应用。