高羊茅抗真菌病基因转化的研究

作     者：马生健 徐碧玉 曾富华 卢向阳湖南农业大学生物技术系 Ma Shengjian;Xu Biyu;Zeng Fuhua;Lu Xiangyang

作者机构：湛江师范学院生物系 中国热带农业科学院热带作物国家重点实验室海南海口571101 

出 版 物：《园艺学报》 (Acta Horticulturae Sinica)

年 卷 期：2006年第33卷第6期

页      面：1275-1280页

核心收录：

学科分类：090706[农学-园林植物与观赏园艺] 0907[农学-林学] 09[农学] 

基　　金：广东省科技计划项目(2002A2070402) 

主　　题：高羊茅 草坪草 农杆菌 转化 真菌 

摘      要：通过农杆菌介导法将双价载体(含抗真菌病的几丁质酶基因Chi和β-1,3-葡聚糖酶基因Glu)导入高羊茅愈伤组织细胞内,建立了高羊茅的农杆菌转化体系,获得了抗真菌病的转基因高羊茅植株。在转化过程中,确定了卡那霉素(Kan)筛选剂的浓度以200～300mg/L为宜,联合运用羧苄青霉素(Carb)与头孢霉素(Cef)作为抗菌素能得到好的脱菌效果;农杆菌的几种共培养方式对转化频率的影响表明,共培养基上垫一层滤纸,愈伤周围滴加浸染液,恢复培养1周后用甘露醇和抗生素液洗涤,是一种好的转化方式。对转化植株进行PCR分析和分子杂交及禾谷镰刀菌挑战接种,发现转化植株有高阳性率及抗真菌能力。