噬菌体抗体库的构建及抗猪脂肪细胞膜单抗的筛选
Construction of Phage Antibody Library and Screening of Monoclonal Antibodies Specific for Porcine Adipocytes作者机构:中国农业大学农业生物技术国家重点实验室北京100094 泰安271018 泰安271018 北京100094 泰安271018 中国农业科学院畜牧研究所山东农业大学动物科技学院山东农业大学动物科技学院中国农业大学农业生物技术国家重点实验室山东农业大学动物科技学院 北京100094
出 版 物:《中国农业科学》 (Scientia Agricultura Sinica)
年 卷 期:2005年第38卷第6期
页 面:1260-1263页
核心收录:
学科分类:090602[农学-预防兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:国家自然科学基金资助项目(30070543) 北京市自然科学基金资助项目(5032012)
摘 要:用猪脂肪细胞以免疫删减法免疫小鼠,取其脾细胞,RT-PCR扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,克隆入噬菌粒表达载体pCANTAB5E中,构建单链抗体(ScFv)文库。用猪脂肪细胞,对其进行3轮吸附-洗脱-富集,筛选抗猪脂肪细胞膜单抗。经ELISA检测,51/96克隆具有与猪脂肪细胞结合活性,阳性率为53%,与猪肝细胞则成阴性反应,初步证明了单抗的特异性,为猪脂肪细胞膜单抗的制备提供了一种新的方法。