小鼠窦前卵泡的体外培养

作     者：汪玉宝 高敏芝 顾敦瑜 吴晓云 陈淑颖 陆湘 何志英 WANG Yu-bao, GAO Min-zhi,GU Dun-yu, WU Xiao-yun,CHEN Shu-ying, LU Xiang,HE Zhi-ying(Infertility and IVF Center of Shanghai Institution of Planned Parenthood Research , Shanghai 200032, China;Cornell University, Reproductive Medicine and Infertility Center, NY 10021, USA)

作者机构：上海市计划生育科学研究所不孕症试管婴儿中心上海200032 美国Comell大学生殖医学和不孕症中心纽约10021 

出 版 物：《复旦学报（医学版）》 (Fudan University Journal of Medical Sciences)

年 卷 期：2004年第31卷第1期

页      面：42-45页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071008[理学-发育生物学] 10[医学] 

基　　金：上海市自然科学基金(01ZB14037) 

主　　题：小鼠 窦前卵泡 体外培养 形态学 卵泡发育 实验 卵母细胞数 

摘      要：目的 观察性成熟前小鼠的窦前卵泡体外培养的形态学改变,同时评价激素及生长因子等添加物对窦前卵泡体外发育的影响。方法 机械法分离性成熟前小鼠卵巢中的窦前卵泡,分2组培养于20μL培养液滴内。(1)Gn组:α-MEM+10％FCS+100 mU/mL rFSH±ITS(5 μg/mL insulin,5 μg/mL transferrine,5 ng/mLselenium)±10 mU/mL rLH,第12天移入 α-MEM+1.5 U/mL rHCG+5 ng/mL rEGF+10％ FCS。(2)nGn组:α-MEM+10％ FCS。每天换液观察,记录GC增生、窦形成等形态学改变和卵母细胞成熟情况。结果 激素组窦前卵泡增长明显,92.92％存活,28.65％形成窦,培养14d后40.35％排出成熟卵;而无激素组窦前卵泡生长缓慢,生存6d后开始萎缩、变黑,存活率仅10.91％,无窦卵泡形成,仅11.11％排出成熟卵,差异有显著意义(P0.01)。激素组在添加ITS、LH后,窦前卵泡的窦形成率和排出成熟卵母细胞率均显著上升(P0.05)。结论 α-MEM可作为窦前卵泡体外培养液,但必须添加rLH/rFSH、ITS、rHCG/rEGF以促进膜细胞黏附、颗粒细胞增生和卵母细胞成熟。