狂犬病毒CVS株G基因和IFN-a基因共表达重组腺病毒载体的构建
Construction of recombinant adenoviral vector co-expressing G gene of RV and IFN-a gene作者机构:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046 湖州市农业科学研究院浙江湖州313000 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070
出 版 物:《甘肃农业大学学报》 (Journal of Gansu Agricultural University)
年 卷 期:2008年第43卷第6期
页 面:1-5页
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:甘肃省自然基金项目(3Z S051-A25-076) 甘肃省科技攻关(2GS0S2-A41-006-02)
主 题:狂犬病病毒G基因 IFN—a基因 内部核糖体进入位点序列 重组腺病毒
摘 要:通过RT-PCR方法扩增得到狂犬病毒G基因,PCR方法得到IFN-Αa基因并亚克隆入pIRES获得pIRES-a质粒.双酶切G基因和pIRES-a质粒并回收目的基因与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,再与pAdEasy-1质粒在BJ5183菌中同源重组产生腺病毒载体质粒.线性化后的重组腺病毒质粒转染人胚肾293细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达鉴定重组的腺病毒.结果表明:该重组病毒质粒经酶切鉴定与预期结果一致;转染293细胞后观察到绿色荧光蛋白的表达,说明成功构建了G和IFN-a双基因共表达重组腺病毒载体.