禽流感病毒NS1蛋白在杆状病毒表达系统中的表达

作     者：李东卫 郭莹莹 刘在斯 王世达 沈楠 文辉强 焦同路 王靖飞 LI Dong-wei;GUO Ying-ying;LIU Zai-si;WANG Shi-da;SHEN Nan;WEN Hui-qiang;JIAO Tong-lu;WANG Jing-fei

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病诊断中心农业部兽用药物与兽医生物技术重点实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2012年第33卷第6期

页      面：27-31页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所院所长基金(SKLVBP201016) 

主　　题：禽流感病毒,NS1蛋白 杆状病毒表达载体系统 蛋白纯化 

摘      要：为获得纯化的禽流感病毒(AIV)的NS1蛋白,将A/chicken/Guangxi/10/99(H9N2)(CK/GX/10/99)NS1全长核苷酸克隆至杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,构建了重组转移载体pFastBacHTA-NS1,然后转化入DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得表达NS1基因的重组杆状病毒。用重组杆状病毒转染昆虫细胞sf9进行NS1蛋白的表达,通过SDS-PAGE电泳、Western blot、间接免疫荧光(IFA)对表达的目标蛋白进行分析。结果表明,构建了含NS1基因的重组杆状病毒,分子质量约30ku的重组蛋白得到了表达,为NS1的相关功能研究奠定了基础。